换一批miR-133a靶向MMP-14抑制骨肉瘤细胞侵袭的作用及机制研究
Effect and Mechanism of miR-133a Inhibiting Osteosarcoma Cell Invasion By Targeting MMP-14
摘要目的 研究微小RNA(microRNA,miR)-133a靶向基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-14抑制骨肉瘤细胞侵袭的作用及机制.方法 培养正常成骨细胞株hFOB1.19及骨肉瘤细胞株MG63、U20S、SAOS2,采用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测miR-133a的表达;MG63细胞分为miR-阴性对照(negative control,NC)组、miR-133a组、pcDNA3.1+ miR-NC组、pcDNA3.1+miR-133a组、pcDNA3.1-MMP-14+miR-133a组,转染NC mimic、miR-133a mimic、pcDNA3.1质粒、过表达MMP-14的pcDNA3.1质粒,采用Transwell检测细胞侵袭数目、western blot检测MMP-14表达水平、荧光素酶报告基因实验验证miR-133a靶向结合MMP-14基因mRNA 3'UTR.结果 MG63、U20S、SAOS2细胞中miR-133a的表达水平均低于hFOB1.19细胞且MG63细胞中miR-133a表达水平降低最显著;miR-133a组MG63细胞的侵袭数目少于miR-NC组,MMP-14的表达水平、含有MMP-14野生型3'UTR双荧光素酶报告基因的荧光活力低于miR-NC组;pcDNA3.1-MMP-14+ miR-133a组MG63细胞的侵袭数目多于pcDNA3.1+miR-133a组.结论 miR-133a能够抑制骨肉瘤MG63细胞侵袭,靶向抑制MMP-14基因是可能的分子机制之一.
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