负载纤维蛋白原的胶原膜对大鼠股骨骨折愈合的作用及机制研究

The Effect and Mechanism of Collagen Membranes Loaded With Fibrinogen on the Healing of Femur Fractures in Rats

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摘要目的研究负载纤维蛋白原的胶原膜对大鼠股骨骨折愈合的影响及机制.方法将大鼠股骨骨折模型随机分为三组,分别为对照组、胶原膜组、负载纤维蛋白原胶原膜组.术后第8周取患侧股骨行Micro-CT分析骨痂形成情况.大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)分为成骨对照组、纤维蛋白原+成骨诱导组、纤维蛋白原+PNU-74654+成骨诱导组.BCIP/NBT染色法检测BMSC的碱性磷酸酶(alkaline phosphatases,ALP)水平,Wsetern blot分别检测成骨指标Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ,COL-1)、ALP、Runt相关转录因子 2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、β-Catenin 的蛋白表达.结果 Micro-CT 显示术后 2 个月大鼠股骨骨折端的骨痂形成量,负载纤维蛋白原胶原膜组显著多于胶原膜组和对照组.ALP染色和Western blot结果显示纤维蛋白原能够促进成骨表,且纤维蛋白原通过激活Wnt/β-Catenin信号通路上调成骨指标的表达,而使用PNU-74654(Wnt/β-Catenin通路抑制剂)后成骨指标表达显著下降(P＜0.05).结论负载纤维蛋白原的胶原膜能加速骨折愈合.纤维蛋白原通过激活Wnt/β-Catenin信号通路能促进BMSC成骨分化.