换一批Rac1对 L02肝细胞株上皮细胞间质转化及增殖和凋亡的影响
Effects of Rac1 on epithelial-mesenchymal transition,and proliferation and apoptosis of L02 cells in vitro
摘要目的：检测 Rac1在 TGF-β1诱导的 L02细胞上皮间质转化中的作用，及其对细胞增殖和凋亡的影响。方法应用不同活性的 Rac1质粒 pExRed-NLS Flag（空载体组）、pExRed-NLS Flag Rac1（野生型 Rac1组）、pExRed-NLS Flag Rac1T17N（显性负调控 Rac1组）、pExRed-NLS Flag Rac1G12V（持续活化型 Rac1组）瞬时转染L02细胞，经5 ng/ml TGF-β1处理细胞。采用免疫印迹法检测融合蛋白 Flag-Rac1表达，采用细胞免疫荧光及免疫印迹法检测 Ck8和 Vimentin 表达，采用细胞划痕实验及 Transwell 法检测细胞迁移能力。使用不同浓度的 Rac1特异性抑制剂 NSC23766处理 L02细胞，采用 CCK-8法检测细胞增殖，采用 Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡。结果四组质粒均成功瞬时转染到 L02细胞中；与空载体组和野生型 Rac1组比，持续活化型 Rac1转染细胞Vimentin 蛋白表达水平显著增高，CK8蛋白表达水平降低，细胞迁移能力增加；与空载体组和野生型 Rac1组比，显性负调控 Rac1转染细胞 Vimentin 蛋白表达水平降低，CK8蛋白表达水平增高，细胞迁移能力降低（P<0.05）；在NSC23766处理 L02细胞后，细胞增殖被抑制，但各处理组细胞凋亡无明显差异。结论 Rac1可促进 TGF-β1诱导的 L02肝细胞株上皮间质转化和细胞增殖，但对细胞凋亡无明显影响。
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-5069.2014.05.019
发布时间
2014-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
江苏省自然科学基金（BK2011094）
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