换一批霍乱弧菌ctxB基因真核重组质粒的构建及表达
Construction of Eukaryotic Recombinant Plasmid of ctxB Gene of Vibrio cholerae and Detection of Its Expression in NIH3T3 Cell
摘要目的构建霍乱孤菌ctxB基因真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达.方法用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a-ctxB上切下ctxB基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-ctxB.用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法对pcDNA3.1-ctxB的瞬时表达产物进行鉴定.结果约380 bp的ctxB被克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体中,经测序无误后,用阳离子脂质体转染的方法,检测到重组质粒pcDNA3.1-ctxB在NIH3T3细胞的胞浆和胞膜上得到了表达.结论 ctxB真核表达的成功构建及表达为进一步从分子水平研究霍乱肠毒素B亚单位的免疫原性及其作为佐剂的应用价值提供研究基础.
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分类号
R387.3（医学寄生虫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-2116.2006.01.001
发布时间
2006-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国科学院项目（非规范项目）（39870656）
四川省学术与技术带头人培养项目（4200316）
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