换一批
换一批绿色荧光蛋白的原核表达和纯化及鉴定的实验设计与实践
Experimental design and practice for prokaryotic protein expression,pufication, and idenfication of green fluorescent protein
摘要该文以绿色荧光蛋白FRP为实验对象,通过设计原核蛋白表达、镍柱亲和纯化、荧光光谱分析、SDSPAGE电泳分离、Western blotting免疫印迹及蛋白质质谱鉴定等内容的生物化学综合实验,提高学生的生物化学实验技能.荧光光谱分析表明,纯化的GFP蛋白的最大激发波长为480 nm,最大发射波长为500 nm,与已知的GFP荧光光谱基本相同.SDSPAGE电泳分离发现,GFP的亲和纯化效果好,且纯化得到的GFP分子量约为27 kDa,与理论值相符.该实验适用于生物科学专业本科生系统完整地学习蛋白质表达、纯化和鉴定的实验方法,具有很好的综合性,取得非常好的教学效果.
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关键词
绿色荧光蛋白亲和纯化SDS-PAGE电泳Western blottingLC-MS/MS质谱green fluorescent protein(GFP)affinity chromatographySDS-PAGEWestern blottingLC-MS/MS
分类号
Q-331
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-4956.2014.05.011
发布时间
2014-10-27
基金项目
国家基础科学人才培养基金资助（J1103505,J11030632）
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