摘要目的 探讨橙皮素(HES)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞自噬与凋亡的影响,并初步分析其机制.方法 将SD大鼠分为假手术(Sham)组、MIRI组、低剂量HES(HES-L,15 mg/kg)组、高剂量HES(HES-H,30 mg/kg)组和HES-H+Toll样受体4(TLR4)抑制剂(HES 30 mg/kg+复合物C 0.2 mg/kg)组.连续给药7 d,除Sham组外,大鼠采用冠脉结扎法构建MIRI模型,24 h后检测左心室血流动力学参数[包括左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)];采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死(心梗)面积,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);Western blotting检测大鼠心肌组织中微管相关蛋白1-轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬效应蛋白(Beclin1)、TLR4、磷酸化(p)-TLR4、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、p-ULK1蛋白表达.结果 与Sham组比较,MIRI组大鼠心肌细胞线粒体损伤、自噬空泡形成;LVEDP[mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa):14.22±2.12比 5.44±0.83]、心肌细胞凋亡率[(31.52±4.01)%比(2.41±0.26)%]、心梗面积(mm2:43.68±3.86 比 0.00)、心肌组织MDA(ng/L:8.25±1.03 比 3.71±0.65)、p-mTOR/mTOR(0.76±0.08 比 0.33±0.04)、p-ULK1/ULK1(0.69±0.08比0.22±0.03)均显著升高,dp/dtmax(mmHg/s:3 441.43±289.25比4 910.57±350.12)、-dp/dtmax(mmHg/s:2 588.96±260.23比3 845.94±364.19)、心肌组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(1.13±0.14比2.35±0.21)、Beclin1(0.35±0.06 比 0.87±0.09)、p-TLR4/TLR4(0.40±0.05 比 0.84±0.10)均显著降低(均P<0.05).与MIRI组比较,HES-L、HES-H组大鼠线粒体损伤缓解,自噬空泡少见;LVEDP(mmHg:11.56±1.60、7.88±1.21 比14.22±2.12)、心肌细胞凋亡率[(25.52±3.11)%、(17.54±1.89)%比(31.52±4.01)%]、心梗面积(mm2:36.67±3.58、29.58±3.04比43.68±3.86)、心肌组织MDA(ng/L:6.98±0.65、4.12±0.48比8.25±1.03)、p-mTOR/mTOR(0.60±0.07、0.45±0.05 比 0.76±0.08)、p-ULK1/ULK1(0.54±0.05、0.32±0.04 比 0.69±0.08)均显著降低,dp/dtmax(mmHg/s:3 972.82±310.17、4 442.97±396.24 比 3 441.43±289.25)、-dp/dtmax(mmHg/s:3 152.30±312.18、3 430.57±324.24比2 588.96±260.23)、心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(1.76±0.18、2.01±0.20比1.13±0.14)、Beclin1(0.56±0.07、0.79±0.08比0.35±0.06)、p-TLR4/TLR4(0.55±0.06、0.73±0.08比0.40±0.05)均显著升高(均P<0.05).结论 HES可通过抑制TLR4-mTOR-ULK1信号通路促进MIRI大鼠心肌细胞自噬,抑制凋亡.