人牙髓干细胞向成牙本质细胞定向分化过程中miRNAs表达谱筛选及鉴定
Screening and identification of the expression profile of microRNAs in human dental pulp stem cells during directional differentiation into odontoblasts
摘要目的:筛选人牙髓干细胞向成牙本质细胞定向分化过程中差异表达的microRNAs(miRNAs)并进行初步鉴定.方法:体外分离、培养和鉴定人牙髓干细胞,miRNAs芯片筛选牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中差异表达的miRNAs,并通过TargetScan数据库预测靶基因,实时定量PCR法对结果进行初步鉴定.结果:人牙髓干细胞vimentin、nestin、GFAP和I型胶原4 种细胞表型均表达;成脂诱导3 周后细胞内有油红O染色阳性脂滴出现;成牙本质诱导可见钙结节形成;基因芯片结果显示,牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中,发生2 倍以上表达变化的miRNAs有6 条,其中上调3 条,下调3 条.通过miRNA靶标预测工具预测靶基因,发现hsa-miR-633和hsa-miR-210有与牙髓干细胞分化相关的靶基因;real time-PCR验证hsa-miR-633和hsa-miR-210表达变化与基因芯片结果相符.结论:人牙髓干细胞经诱导向成牙本质细胞分化过程中miRNAs表达谱具有显著变化,为牙髓干细胞分化机制研究提供了新的提示.
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