大鼠脂肪干细胞体外培养及成骨诱导分化研究
Isolation, culture and osteogenic differentiation of rat adipose-derived stem cells
摘要目的:观察SD大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)体外培养的基本生物学特性、鉴定其诱导成骨分化潜能.方法:无菌条件下取6周龄SD大鼠腹股沟处脂肪组织,0.1%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养.显微镜下观察细胞形态;采用MTT比色法绘制细胞生长曲线;用流式细胞仪检测细胞表面标志物;取第3代细胞行成骨和成脂诱导培养,分别用碱性磷酸酶(ALP)、茜素红染色和油红O染色鉴定成骨诱导效果.结果:从SD大鼠脂肪组织中分离获得的ASCs呈长梭形或多角形,呈集落生长;细胞生长曲线呈“S”型,具有较强的增殖能力;流式细胞仪分析示:CD29、CD90高表达,CD34、CD45低表达;成骨诱导后ALP染色及茜素红染色阳性,成脂诱导后油红O染色阳性.结论:分离培养的细胞为ASCs,具有成骨潜能.
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