换一批
换一批瘦素基因在人胎盘间充质干细胞中转染与表达
Transfection and expression of leptin gene in human placental mesenchymal stem cells
摘要目的：构建瘦素（leptin）基因真核表达载体，将其转染至人胎盘间充质干细胞（HPMSCs）中并鉴定其表达。方法：设计leptin基因引物，从人脂肪组织中RT-PCR扩增leptin基因，将获得的基因插入真核表达载体pIRES2-EGFP中，得到重组质粒pIRES2-EGFP-LEP，限制性内切酶双酶切鉴定重组质粒；用脂质体法将重组质粒转染至 HPMSCs 中并通过 RT-PCR及Western blotting法检测目的基因表达，鉴定转染后HPMSCs 的多向分化潜能。结果：RT-PCR扩增得到的特异性片段长度约为500 bp，重组质粒经双酶切后显示5．3 kb和500 bp左右的2条片段；转染后的HPMSCs表达leptin基因，保持多向分化潜能。结论：成功构建了瘦素基因真核表达载体，将其转入HPMSCs中并得以表达。
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分类号
Q786
栏目名称
临床医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1001-3733.2014.04.09
发布时间
2014-08-28
基金项目
国家自然科学基金(编号30471804)
吉林省自然科学基金(编号201015201)
吉林大学“大学生创新性实验计划”项目
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