糖基化终末产物刺激下长链非编码RNA H19通过WNT/β-catenin信号通路调控MC3T3细胞骨向分化

Long non-coding RNA H19 regulates the osteogenic differentiation of MC3T3-E1 cells through WNT/β-catenin signaling pathway under the stimulation of AGEs

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摘要目的:探究长链非编码RNA H19(LncRNA H19)在糖基化终末产物(AGEs)刺激下对小鼠前成骨细胞MC3T3-El成骨分化的调控作用及其可能的机制.方法:10 μg/mL AGEs浓度刺激下培养MC3T3-El细胞,7 d后碱性磷酸酶染色、21 d后茜素红染色观察细胞矿化情况;RT-PCR检测细胞中ALP、Runx-2、OCN、SP7以及LncRNA H19 mRNA的表达水平,Western blotting检测细胞中Runx-2蛋白表达水平;采用细胞转染技术过表达LncRNA H19,RT-PCR检测LncRNA H19的转染效率;并检测转染LncRNA H19后细胞中骨基因的表达水平、ALP染色情况以及β-catenin的表达情况.结果:AGEs刺激下MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶染色变浅、钙化结节形成减少,ALP、Runx-2、OCN、SP7、LncRNA H19基因表达水平降低(P＜0.05),Runx-2蛋白水平表达下降;转染过表达LncRNA H19(lv-H19)后,LncRNA H19表达水平显著上调(P＜0.05),ALP、Runx-2、OCN、SP7基因表达水平上升(P＜0.05),碱性磷酸酶染色变深,β-catenin的表达增加.结论:AGEs刺激下,LncRNA H19可能通过WNT/β-catenin的表达影响了 MC3T3-E1细胞的骨向分化.