静态压应力促进三维培养下的人牙周膜细胞自噬
Static compressive stress accelerting autophagy of human ligament cells in three-dimensional culture
摘要目的:建立一个体外三维培养和静态压应力加载的人牙周膜细胞(hPDLCs)模型,并检测静态压应力对细胞自噬的影响.方法:从新鲜的离体牙表面刮取牙周组织进行培养,获得hPDLCs;提取Ⅰ型鼠尾胶原,制备胶原-藻酸盐复合水凝胶,将hPDLCs包埋进水凝胶中,培养72 h后加力,使用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测自噬相关蛋白LC3,Atg-5,Beclin-1的基因表达,使用蛋白印迹(Western blot)检测Atg-5,Beclin-1及LC3的蛋白表达.结果:细胞在胶原-藻酸盐水凝胶中生长良好;在压应力加载15 min后,hPDLCs自噬水平显著提高,之后逐渐降低到基线水平.结论:胶原方木藻酸盐水凝胶具有良好的生物相容性与安全性,可作为细胞体外三维培养的优良载体;静态压应力可以促进细胞自噬,且这种促进作用是迅速而短暂的.
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