甲基转移酶METTL3对口腔鳞癌细胞放疗敏感性的调控作用研究
Regulation of methyltransferase METTL3 on radiotherapy sensitivity of oral squamous cell carcinoma cells
摘要目的:研究甲基转移酶METTL3对口腔鳞癌细胞放疗敏感性的影响.方法:对口腔鳞癌细胞CAL27、SCC9和SCC15分别给予2、4和8 Gy的X射线照射,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,qRT-PCR及Western blot检测不同放射剂量下细胞中甲基化基因的RNA及蛋白表达,LC-MS/MS法对细胞中m6A进行定量,流式细胞术检测敲低及过表达MET-TL3后CAL27及SCC15中细胞凋亡水平,克隆形成实验观察在CAL27及SCC15中敲低和过表达靶基因后进行放射处理,观测细胞克隆形成率的变化.结果:3种细胞凋亡率均呈X射线剂量依赖性升高,各剂量下CAL27细胞凋亡率最高,SCC15细胞最低.CAL27中METTL3的RNA及蛋白表达水平显著低于SCC15.m6A定量结果显示CAL27中甲基化修饰水平低于SCC15.CAL27及SCC15细胞经不同剂量放射处理后,METTL3的表达均升高.敲低METTL3后均使细胞的凋亡率增加及克隆形成率降低,过表达METTL3使细胞凋亡率减少、克隆形成率升高.结论:调控METTL3可以影响口腔鳞癌细胞的放射治疗敏感性,有可能成为口腔鳞癌放疗增敏的新靶点.
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