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α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对人增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响

Effect of antisense oligodeoxynucleotides of type α1(Ⅰ) precollagen gene on the biological characteristics of human hypertrophic scar fibroblasts

摘要目的 探讨应用α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞生长、胶原合成等生物学特性的影响.方法 根据转染液分3组,实验组为脂质体加α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸;对照组1为脂质体组;对照组2为培养基空白对照组.用脂质体法将α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸转染增生性瘢痕成纤维细胞并运细胞计数法绘制细胞生长曲线;电子透射电镜观察转染后各组HF超微结构的变化;转染后0.5、1、3、5、7 d 分别提取各组细胞总RNA,行RT-PCR后测定各组Ⅰ胶原mRNA 表达量;Western-bloting法检测转染后各组Ⅰ型胶原蛋白的变化.结果 ①反义寡聚脱氧核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞生长增殖无抑制;②实验组增生性瘢痕成纤维细胞蛋白合成的细胞器呈非活跃状态;③与对照组比较,实验组HF的α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA 的表达和Ⅰ型胶原合成量明显减少.结论 α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸能抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA 的表达和Ⅰ型胶原蛋白的合成,提示可能抑制瘢痕增生.

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