唐古拉特烧伤液牦牛跟腱胶原蛋白海绵对烧伤大鼠创面自噬与愈合的研究
Study on wound healing and autophagy of yak achilles tendon collagen sponge in tanggulat burn rats
摘要目的 研究唐古拉特烧伤液牦牛跟腱胶原蛋白复合海绵对大鼠Ⅱ度烧伤创面愈合的影响,明确该复合海绵对大鼠表皮细胞增殖和自噬的调控作用.方法 自2022年1月至2024年12月,青海大学附属医院烧伤整形科将健康雄性SD大鼠随机分为4组(6只/组):正常对照组(Con组)、模型组(Mod组)、牦牛跟腱胶原蛋白海绵烧伤组(CPS组)和唐古拉特烧伤液牦牛跟腱胶原蛋白复合海绵烧伤组(CS组).在大鼠背部造成4个直径为1.5 cm的Ⅱ度烧伤创面,并于第3、7、14、28天测量创面直径,同时检测皮肤组织匀浆中LC3、Beclin-1、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和PCNA的蛋白表达.取大鼠表皮细胞传代至第3代后同步化处理,分别用正常血清(空白对照)、模拟烧伤血清、烧伤血清、烧伤血清+凡士林纱布和烧伤血清+唐古拉特烧伤液牦牛跟腱胶原蛋白复合海绵(复合海绵组)干预24 h.检测细胞增殖率及PCNA、LC3、Beclin-1表达水平.结果 动物实验显示,与Con组相比,Mod组大鼠烧伤后自噬相关蛋白Beclin-1和LC3从第3天开始显著增加,第7天达峰,第28天基本恢复.CPS组和CS组大鼠组织中这两种蛋白表达量显著低于Mod组,且CS组效果更明显.Mod组增殖相关蛋白PCNA在治疗早期显著升高,第28天降低;而TGF-β1表达量始终低于Con组.CPS组和CS组中PCNA和TGF-β1表达量较Mod组显著升高,且CS组效果更显著.细胞实验表明,与正常血清组相比,各处理组(烧伤血清组、烧伤血清+凡士林纱布组、烧伤血清+复合海绵组)的细胞增殖率和PCNA蛋白浓度降低,而Beclin-1及LC3蛋白表达增加.同时,与模拟烧伤血清组相比,各处理组也表现出相同的趋势.然而,烧伤血清+复合海绵组在细胞增殖率、PCNA蛋白浓度上高于烧伤血清组和烧伤血清+凡士林纱布组,而在Beclin-1及LC3蛋白表达上也呈现出相同的趋势.结论 (1)复合海绵可降低烧伤大鼠皮肤组织中Beclin-1及LC3表达,减轻过度自噬引起的组织损伤.(2)复合海绵增加烧伤大鼠皮肤中TGF-β1及PCNA表达,促进细胞增殖和创面愈合.(3)烧伤血清早期干预导致大鼠表皮细胞增殖率及PCNA降低,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1升高.(4)唐古拉特复合海绵能调控烧伤血清干预后的表皮细胞增殖及自噬.
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