人源胚胎干细胞来源外泌体治疗药物诱导的生长期脱毛模型小鼠研究
Role and mechanisms of human embryonic stem cell-derived exosomes in promoting hair regeneration in cyclophosphamide-induced anagen hair loss mice
摘要目的 探讨人源胚胎干细胞来源外泌体(ESC-Exos)对环磷酰胺诱导的生长期脱毛小鼠模型毛发再生的作用及其潜在分子机制.方法 采用超高速离心法从人源ESC条件培养基中分离ESC-Exos并对其进行鉴定.将 45 只SPF级C57BL/6 雌性小鼠随机分为 3 组(空白组、模型组、治疗组),每组 15 只,第 0 天石蜡、松香 1:1 混合加热后脱毛,第 9 天对模型组和治疗组小鼠腹腔注射环磷酰胺 120 mg/kg诱导生长期毛发脱落,待第 14 天小鼠毛发完全脱落后,治疗组小鼠皮下多点注射ESC-Exos 50 μg/只,隔日 1 次,共 3 次,空白组和模型组皮下注射等量 0.9%氯化钠注射液.分别于第 0、9、14、21、28 天切取小鼠后背组织作为标本,通过毛发电镜、苏木精-伊红(HE)染色、β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光染色评估毛囊组织结构变化.结果 与模型组相比较,治疗组小鼠后背皮肤毛发覆盖率明显增多、毛干直径增粗(P<0.05),与空白组毛发形态相近.HE染色、β-半乳糖苷酶染色显示单位面积内毛囊数量显著增加,毛球部结构、形态完整,毛母质细胞致密排列,毛囊隆起位置部位SA-β-半乳糖苷酶染色信号减弱,音速刺猬蛋白(SHH)及CK15 荧光信号增强,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ESC-Exos能够有效促进环磷酰胺诱导的生长期脱毛小鼠模型毛发再生,其作用机制可能与SHH蛋白促进毛囊干细胞增殖、抑制毛囊干细胞衰老有关.
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