换一批
换一批异种肝移植手术前后移植肝差异表达基因的筛选及验证
The screening and proving of genes differentially expressed after liver xenotransplantation
摘要目的 探讨异种移植手术前后移植肝内差异表达基因的变化,并且进行筛选及验证.方法 以α-1, 3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、藏酋猴为受体,完成4例异种脾窝辅助性肝移植手术.于供肝修整时切取适量术前标本,于移植肝开放血流后48小时以肝穿刺活检获得术后标本.对手术前后的移植肝标本进行miRNAs 和mRNAs 的高通量芯片分析,筛选出关键的差异表达miRNAs 和mRNAs,并进行实时定量PCR及Western Blot实验验证.结果 与术前相比,有165 个miRNAs在术后出现差异表达,其中上调分子112 个,下调分子53 个.筛选并验证mi-23b 等12个出现显著差异表达的miRNAs,除miR-150和miR-126-3p外,其他miRNAs 的表达变化情况与miRNAs 芯片结果基本相符.与术前相比,有2 035 个mRNAs 在术后出现显著差异表达,其中922个表达上调、1 113个表达下调,筛选IGFBP6、CDK2AP1、TNFAIP6、FⅦ、NKG2D等5个生物学功能与肝脏移植密切相关的差异表达基因进行mRNA 和蛋白水平验证.除NKG2D 外,其他4 个基因的蛋白水平表达变化与mRNA 水平变化基本一致(均P＜0.05),但CDK2AP1 的蛋白变化幅度较小,差异无统计学差异(P＝0.073).结论 异种肝移植术后移植肝的miRNAs 和mRNAs 表达出现较大变化,这些差异表达基因可能与免疫损伤及凝血功能障碍有关.
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关键词
异种移植肝脏移植小型猪藏酋猴微小核糖核酸信使RNAXenotransplantationLiver transplantationMiniature pigTibetan macacaMicroRNAsmRNAs
主题词
肝移植(Liver Transplantation)基因(Genes)移植, 异种(Transplantation, Heterologous)猪, 雏型(Swine, Miniature)核糖(Ribose)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-5332.2018.05.003
发布时间
2018-11-28
基金项目
陕西省自然科学基础研究计划资助项目（2017JM8014）；
陕西省社会发展科技攻关项目（2015SF067）；
国家"973"计划基金资助项目（2015CB554100）；
国家重点研发计划资助项目（2017YFC1103703）；
国家"863"计划基金资助项目（2012AA021005）；
国家自然科学基金资助项目（81300361,81270549,81670593,81470873,81671838）；
陕西省科技统筹创新工程计划资助项目（2012KTCL03-01,2011KTCL03-15）；
西京医院学科助推计划基金资助项目（XJZT12M09, XJZT13Z01,XJZT14Z04）
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