大白菜BcPLH基因的原核表达及其蛋白产物的Western分析
PROKARYOTE EXPRESSION AND WESTERN ANALYSIS OF BcpLH GENE OF CHINESE CABBAGE
摘要BcpLH基因是大白菜包叶组织特异的新基因,含有双链RNA结合域.在含有His标记序列的原核表达载体pET28-a(+)上插入Bc-pLH基因的cDNA,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达出了特异性蛋白,并免疫大白兔制备出高效价的抗血清;同时,将BcpLH基因插入到含有超级助溶剂的pMAL-c2载体上,并在大肠杆菌DH5α中诱导表达,结果获得了可溶的蛋白.Western斑点印迹分析的结果证明了BcpLH的特异性.BcpLH活性蛋白及其抗血清的产生为研究BcpLH基因的RNA结合活性及其在植物发育上的调节机制创造了条件.
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