换一批
换一批永生化软骨细胞的生物学特性
BIOLOGICAL CHARACTERIZATION OF IMMORTALIZED PORCINE CHONDROCYTES BY INTRODUCTION OF TELOMERASE
摘要本实验为建立永生化的猪耳软骨细胞系并探讨它的生物学特性,以包含人端粒酶逆转录酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的逆转录病毒载体(pBABE-hTERT)转染至正常猪耳软骨细胞中.经筛选、挑取克隆,得永生化软骨细胞系(TL1),在体外已连续培养10个月.RT-PCR和PCR-ELISA法测得其有高水平的端粒酶稳定表达.通过生长曲线、HE染色、流式细胞仪分析,以及裸鼠成瘤实验,表明它的细胞增殖能力增加,凋亡率下降并维持在体外培养早期细胞的水平,且细胞无恶变迹象.对软骨特异性分子的RT-PCR、Western杂交和免疫组化的结果分析,发现TL1中有SOX9的表达;无结构完整的aggrecan表达;有低水平的Ⅱ型胶原表达;Ⅰ型胶原的表达随细胞的表型改变而改变.综上所述,通过外源性hTERT的稳定表达,建立了永生化的猪耳软骨细胞系;但是它在单层培养的状态下,软骨细胞特异性的基因表达逐步发生改变,导致其部分丧失软骨细胞的正常表型.
更多相关知识
分类号
Q2
DOI
10.3321/j.issn:1673-520X.2003.06.005
发布时间
2007-05-21
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)（G1999054304）
- 浏览90
- 被引1
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
