换一批
换一批同型半胱氨酸对内皮细胞一氧化氮合酶系统的损伤机制及叶酸的拮抗效应
THE PATHOGENIC MECHANISM OF HOMOCYSTEINE -INDUCED ENDOTHELIAL NITRIC OXIDE SYNTHASE DYSFUNCTION AND THE ANTAGONISTIC EFFECTS BY FOLIC ACID
摘要本实验探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮合酶(eNOS)的损伤机制及叶酸(FA)的拮抗效应.HUVEC原代培养,传至第3代后,将其与不同浓度Hcy(10μmol/L、30μmol/L、100μmol/L和300μmol/L)、FA(100μmol/L)或两者联合共同培养72h,用RT-PCR和免疫组织化学技术分别估测细胞eNOS mRNA水平及eNOS蛋白质量;高效液相色谱测定细胞内不对称二甲基精氨酸(ADMA)含量;并分别测定二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)、eNOS活性及一氧化氮(NO)含量.HUVEC与不同浓度Hcy培养72h后,eNOS mRNA和蛋白质表达皆受到抑制;eNOS活性降低;NO生成减少.同时,DDAH活性降低;细胞内ADMA含量呈剂量依赖性增加.加入FA后,eNOS蛋白质水平上调;eNOS活性增强;NO生成增多.同时,DDAH活性增强,ADMA蓄积减少;但eNOSmRNA表达没有改变.Hcy对内皮细胞eNOS的损伤机制涉及eNOS酶蛋白和eNOS的基因表达两个层面,其对eNOS酶蛋白的抑制机制可能通过DDAH-ADMA通路,FA可拮抗Hcy对eNOS酶蛋白的抑制作用,显示出对HHcy有一定的保护作用.但FA对HHcy所导致的eNOS基因表达的抑制无保护效应.
更多相关知识
- 浏览223
- 被引17
- 下载45
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
