换一批摘要AHLs是革兰氏阴性细菌在增殖过程中产生的一类信号分子,与其致病性密切相关.AiiA蛋白作为一种胞内解酯酶,能水解致病菌产生的AHLs分子,使内酯环开环后不能再激活某些胞外酶的表达,从而极大地减弱了细茵的致病性.本研究从苏云金芽孢杆菌LLB15中分离编码aiiA基因的质粒DNA,用PCR方法克隆aiiA基因,并利用pET载体构建6-His融合表达质粒pET29a-aiiA,转化E.coli BL21(DE3)茵株,并筛选得到E.coli BL21(DE3)-pET29a-aiiA工程茵.在20℃的低温和0.8 mmol/L IPTG条件下,经25 h的诱导表达,获得了54.4μg/mL可溶性AiiA蛋白.通过镍柱亲和层析,在国内外首次纯化了带6-His标记的AiiA蛋白.水解活性和抗病性检测表明,该蛋白能水解AHLs分子,对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用.
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分类号
Q5（生物化学）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1673-520X.2008.06.005
发布时间
2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30571257）
高等学校博士学科点专项科研基金（20060389011）
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