乙肝病毒突变体HBx-d382特异性抗体的制备及鉴定
Preparation and identification of Specific antibody against deletion mutant HBx-d382
摘要目的 制备乙肝病毒X基因突变体HBx-d382特异性抗体. 方法 运用生物信息学和多肽合成法制备HBx-d382特异性多肽(HBx-d382P),采用高效液相色谱法(HPLC)和电喷雾离子化质谱(ESI-MS)测定合成多肽的纯度和分子量.用化学方法将多肽与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联成多肽抗原HBx-d382P-KLH,并经完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)乳化,免疫新西兰雄性大白兔.用ELISA鉴定抗血清效价、亲和层析法纯化抗体、Dot blot评价抗体特异性. 结果 经HPLC和ESI-MS分析,合成多肽符合HBx-d382特异性抗体制备的要求.ELISA和Dot blot试验结果显示,兔抗血清的效价为6.4×104,纯化后的HBx-d382抗体特异性高. 结论 获得了高效价高特异性的HBx-d382多克隆抗体,为进一步研制HBx-d382免疫检测试剂盒打好了基础.
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