截短型水痘带状疱疹病毒gE融合分子内佐剂的原核表达及其免疫原性
Prokaryotic expression and immunogenicity of truncated varicella zoster virus gE fused with intramolecular adjuvant
摘要目的 原核表达水痘带状疱疹病毒gE融合分子内佐剂的融合蛋白,并评价其免疫原性.方法 以pET28-a质粒为载体,构建水痘带状疱疹病毒蛋白E(glycoprotein E,gE)融合破伤风毒素(tetanus toxoid,TT)通用表位P2基因,并将其转化至大肠杆菌中,经IPTG诱导表达,亲和色谱纯化,获得纯度较高的gE-TT蛋白.将gE-TT蛋白免疫小鼠,检测小鼠的血清特异性IgG抗体滴度,评价其免疫原性.结果 构建的重组大肠杆菌工程菌经IPTG诱导能稳定的表达gE-TT蛋白,经分离纯化后,获得分子量约为62 kD的gE-TT蛋白,并能与anti-VZV gE抗体特异性结合;ELISA检测显示小鼠血清产生了较强的gE-TT特异性IgG抗体.结论 本研究已在大肠杆菌系统中成功表达了重组gE-TT蛋白,该蛋白可有效引起小鼠的体液免疫反应,为水痘带状疱疹病毒的实验室研究和疫苗制备奠定基础.
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