换一批
换一批摘要目的:探索Smad蛋白在肺部肿瘤形成过程中的分子机制,构建带FLAG标签的smad1、2、3、4的真核表达我体,并检测其在293T细胞中的表达.方法:以人肺细胞cDNA文库为模板.分别扩增smad1、2、3、4基因全长编码区序列,克隆到pCDNA3-FLAG真核表达载体上.用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染293T细胞,Western-blot法检测细胞中的FLAG融合蛋白的表达.结果:酶切鉴定和DNA序列分析显示构建了正确的FLAG-smad真核表达载体,并都能在真核细胞中表达分子量大小相符的重组蛋白.结论:成功地构建了FLAG-smad1、2、3、4真核表逸载体,为Samd蛋白及其相关蛋白在肺部肿瘤的作用研究奠定了基础.
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