miR-195通过靶向调控SerpinA3促进胃癌细胞增殖、转移及侵袭的实验研究

MiR-195 targeting SerpinA3 inhibits proliferation,metastasis and invasion of gastric cancer cells

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摘要目的研究miR-195通过靶向调控SerpinA3促进胃癌细胞增殖、转移及侵袭的分子机制.方法选取胃癌MGC803及NCI-N87细胞株为研究对象,分别转染miR-195及RNA阴性对照序列.采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-195的表达水平;MTT检测转染miR-195对肿瘤细胞分裂增殖能力的影响;Transwell侵袭实验分析miR-195对细胞侵袭力的作用;细胞划痕实验检测miR-195对细胞转移力的作用;流式细胞仪检测并评价转染miR-195对肿瘤细胞分裂周期的影响;Western blot探究miR-195对肿瘤细胞SerpinA3表达的调节;采用Spearman相关分析法分析miR-195及SerpinA3表达的相关性;荧光素酶实验验证miR-195与SerpinA3的靶向关系.结果 MTT实验表明高表达miR-195可明显抑制细胞的体外增殖能力;Transwell侵袭实验结果提示转染miR-195可导致细胞侵袭能力明显降低;流式细胞术结果表明,转染miR-195后G1和G2期细胞增加,S期细胞减少;划痕试验结果表明,转染miR-195可以抑制细胞的迁移能力;Western blot结果显示,miR-195-mimics组细胞SerpinA3蛋白含量低于miR-NC组(P<0.05);miR-195 mRNA水平与SerpinA3蛋白含量负相关(r=-0.464,P<0.01);miR-195可直接靶向SerpinA3.结论 miR-195可抑制胃癌恶性行为,其机制与调控SerpinA3有关.