换一批Mus81基因沉默对MCF⁃7人乳腺癌细胞系增殖凋亡及化疗敏感性的影响
Effects of methyl methansulfonate and UV sensitive gene clone 81 on proliferation,apoptosis and chemo?sensitivity of MCF?7 human breast cancer cell line
摘要目的 研究Mus81基因沉默对MCF?7人乳腺癌细胞系增殖、凋亡和化疗敏感性的影响并初步探讨其调控机制.方法 首先构建Mus81沉默的MCF?7乳腺癌细胞系,使用噻唑蓝(MTT)法和平板克隆实验检测细胞生长和增殖,碘化丙锭(PI)染色法和膜联蛋白V(Annexin V)?APC染色法检测细胞周期及凋亡的变化.qRT?PCR检测Mus81沉默后下游基因的表达,MTT法检测化疗药物的50％抑制浓度(IC50)及逆转指数(RI).结果 (1)MTT生长曲线和平板克隆实验显示Mus81基因沉默后MCF?7细胞系增殖显著减缓(P<0.001),细胞克隆数明显下降(P<0.001).(2)Annexin V?APC和PI染色检测显示MCF?7细胞凋亡率升高(P<0.001),并出现明显的G2/M期阻滞.(3)MTT检测结果显示,Mus81沉默后MCF?7细胞对顺铂、阿霉素、表阿霉素和5?氟尿嘧啶的IC50值明显降低,RI依次为5.118、3.070、3.027及8.997.(4)qRT?PCR及Western blot检测下游信号通路表达的结果显示,Mus81沉默后MCF?7细胞中的APAF1、APC和PTEN基因表达升高,MAPK3和MAPK1基因表达降低.结论 Mus81基因沉默可明显抑制MCF?7人乳腺癌细胞系的生长增殖并诱导G2/M期阻滞及细胞凋亡,还可提高MCF?7细胞对顺铂、阿霉素、表阿霉素和5?氟尿嘧啶的敏感性,其机制可能与调控APAF1、APC、PTEN、MAPK1及MAPK3等下游基因的表达有关,提示Mus81可能是一个潜在的乳腺癌治疗靶点.
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分类号
R737.9（泌尿生殖器肿瘤）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006⁃5725.2022.12.007
发布时间
2022-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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