换一批
换一批METTL3介导IGF2BP3 m6A修饰对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移的影响
Effects of METTL3 mediated IGF2BP3 m6A modification on proliferation and migration of hepatoblasto?ma cells in children
摘要目的 分析METTL3介导IGF2BP3 m6A修饰对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移的影响,为临床治疗应用提供依据.方法 采用qRT?PCR检测小儿肝母细胞瘤HuH?6中METTL3和IGF2BP3 mRNA的表达;Western blot检测METTL3和IGF2BP3蛋白表达.通过慢病毒转染,在HuH?6细胞中敲低METTL3,并通过免疫印迹验证METTL3蛋白表达,采用qRT?PCR与Western blot检测IGF2BP3的表达,m6A甲基化RNA免疫沉淀技术分析IGF2BP3 mRNA m6A修饰的情况;CCK?8和Transwell小室实验检测细胞增殖和迁移能力.结果 采用METTL3 sgRNA干预后会显著降低细胞METTL3表达水平(P<0.05);sgRNA组细胞48 h和72 h时细胞增殖水平明显低于空载体组(P<0.05);sgRNA组细胞24 h和48 h时细胞迁移明显低于空载体组,sgRNA组细胞侵袭水平明显低于空载体组;sgRNA组细胞中IGF2BP3蛋白及mRNA表达水平明显低于空载体组,且差异均有统计学意义(P<0.05);sgRNA组细胞中m6A?IP及IGF2BP3 m6A相对表达量明显低于空载体组,且差异均有统计学意义(P<0.05).结论 METTL3可有效调节IGF2BP3 m6A修饰并对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移进行调控.
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