换一批
换一批二氧化硅通过调节人气道上皮细胞自噬促进MUC5AC表达
SiO2 increases MUC5AC expression by regulating autophagy in human airway epithelia cells
摘要目的 探讨二氧化硅(SiO2)对人气道上皮细胞株(Beas-2b)黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响及其作用机制.方法 用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基在37℃和5％CO2的培养箱培养Beas-2b.使用NC-siRNA、ATG5-siRNA、BECN1-siRNA及mCherry-EGFP-LC3等慢病毒转染Beas-2b.各转染组细胞用相应慢病毒(MOI=20)转染12 h后换新鲜培养基,并用嘌呤霉素(1μg/mL)进行筛选,获得稳定转染细胞株.用SiO2(100μg/mL)刺激前述稳定转染细胞株24 h,并设PBS对照组.免疫荧光和免疫印迹检测MUC5AC、自噬相关蛋白5(ATG5)、BECN1和微管相关蛋白轻链3(LC3)的蛋白水平;共聚焦显微镜观察人气道上皮细胞自噬情况.结果 SiO2组的MUC5AC、ATG5、BECN1和LC3Ⅱ的表达高于对照组(P<0.05);ATG5和BECN1敲减细胞株中,SiO2刺激后MUC5AC和LC3Ⅱ的表达均低于对照组(P<0.05).结论 SiO2可通过调节人气道上皮细胞自噬促进MUC5AC表达,其作用机制与ATG5和BECN1信号途径相关.
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