换一批
换一批CCN5基因敲降对MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响及其作用机制
Effect of CCN5 gene knock-down on the proliferation of MCF-7 breast cancer cells and its mechanism
摘要目的 探讨 CCN5 基因敲降对人乳腺癌细胞增殖的影响;探索CCN5在人乳腺癌细胞增殖中的作用机制;探寻CCN5与乳腺癌发生、发展中的相关性.方法 设置CCN5siRNA转染组,慢病毒空载体转染组,空白对照组,分别采用不同处理方法.CCN5siRNA转染组(以下简称"转染组"):慢病毒载体介导的CCN5siRNA转染人乳腺癌细胞MCF-7;慢病毒空载体转染组(以下简称"空载组"):慢病毒空载体转染人乳腺癌细胞MCF-7;空白对照组不进行任何转染操作.采用MTT法检测各组细胞的增殖能力变化,采用RT-PCR、Western blot检测各组细胞CCN5、Skp2和P27Kip1mRNA及蛋白表达.结果 MTT实验表明:转染组细胞增殖力高于空载组和空白对照组;RT-PCR和Western blot结果表明:转染组CCN5mRNA和蛋白水平低于空载组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);转染组Skp2、P27Kip1mRNA和蛋白水平高于空载组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CCN5siRNA抑制CCN5mRNA和蛋白表达,促进乳腺癌细胞增殖,并且通过上调Skp2、下调P27Kip1诱导乳腺癌细胞增殖.
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