摘要目的 分析微管蛋白2A(TUBB2A)在肝细胞癌中的表达及预后价值,检测TUBB2A在缺氧微环境中对肝癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库和定量PCR分析TUBB2A在肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达及其与肝细胞癌预后的关系.在常氧和缺氧条件下处理肝癌细胞HepG2和Hep3B,采用定量PCR和Western blot检测TUBB2A的mRNA和蛋白表达水平.通过慢病毒感染技术构建稳定过表达和敲除TUBB2A的肝癌细胞株HepG2和Hep3B,在缺氧条件利用CCK-8、集落形成实验、Transwell迁移与侵袭实验检测TUBB2A的表达变化对肝癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响.Western blot检测TUBB2A对肝癌细胞中糖酵解关键蛋白,葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)和乳酸脱氢酶A(LDHA)表达的影响.结果 TCGA数据库分析显示,TUBB2A在肝癌中的表达显著高于癌旁组织(P<0.01),TUBB2A高表达的肝细胞癌患者的总生存率更低(P<0.01).TUBB2A在30例临床肝细胞癌组织标本中的mRNA表达水平高于相应癌旁组织(P<0.05),同时TUBB2A的表达与肝癌患者的临床分期(Ⅰ期和Ⅳ期)和甲胎蛋白(AFP)水平呈正相关(P均<0.05).在缺氧诱导的肝癌细胞HepG2和Hep3B中,TUBB2A mRNA和蛋白表达水平均显著上升(P<0.05,P<0.01).缺氧条件下,在肝癌细胞HepG2和Hep3B中过表达TUBB2A,能够促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭,同时上调糖酵解关键蛋白GLUT1、PKM2和LDHA的表达;而敲除TUBB2A后,两种肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力均受到抑制,GLUT1、PKM2和LDHA的表达也显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 TUBB2A在肝细胞癌中高表达,与患者预后不良呈正相关.TUBB2A促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭与糖酵解的作用可能与缺氧微环境相关,其可能成为肝细胞癌预后与治疗的潜在靶点.