非POU域八聚体结合蛋白在糖尿病肾病肾组织中的表达和意义
Expression and significance of non POU domain octamer binding protein in renal tissue of di-abetes nephropathy
摘要目的 探讨非POU域八聚体结合蛋白(NONO)在糖尿病肾病(DN)肾组织中的表达和意义.方法 收集我院12 例DN患者肾组织,按病理活检分为早期DN组(n=6)、晚期DN组(n=6),6 例正常肾组织作为对照组.均行HE、Masson染色观察病理变化和纤维化程度,行NONO、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)及Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)免疫组化染色,以及NONO和WT1、AQP1 的免疫荧光双染观察蛋白表达水平.用Image J对所有染色进行定量分析.Pearson法分析NONO和MMP-9表达水平的相关性以及两者与Col-Ⅰ和Col-Ⅲ的相关性.用低糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)分别刺激肾小管上皮细胞HK2 及肾小球系膜细胞SV40 MES13 不同时长(24、48、72h)后行Western blot检测NONO水平.结果 与对照组相比,DN患者肾脏病变明显,胶原沉积增加,NONO、MMP-9、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ表达升高,晚期更显著(P<0.05).NONO主要表达于肾小管上皮细胞及肾小球系膜细胞的胞核内.NONO表达水平与MMP-9、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ呈正相关,MMP-9表达水平与Col-Ⅰ呈正相关(P<0.05).Western blot检测显示高糖可刺激HK2 及SV40 MES13 细胞NONO的表达.结论 NONO在DN肾组织中呈高表达,且与肾组织MMP-9表达量和肾脏纤维化有相关性.
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