泛素羧基末端水解酶37对胰腺癌SW1990细胞增殖的影响

Effect of ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 37 on the proliferation of SW1990 pancreatic cancer cells

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摘要目的观察胰腺癌SW1990细胞中泛素羧基末端水解酶37(UCH37)对细胞分裂周期蛋白25A(CDC25A)的调控作用,探讨其对SW1990细胞增殖的影响.方法取对数生长期正常人胰腺HPDE细胞及胰腺癌SW1990细胞,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测UCH37 mRNA及蛋白相对表达量.取对数生长期SW1990细胞分为UCH37敲低组(转染sh-UCH37慢病毒)、UCH37空白组(转染UCH37-NC慢病毒).转染48 h,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测2组UCH37、CDC25A mRNA及蛋白相对表达量,采用细胞克隆形成实验检测2组细胞集落形成数;转染后培养24、48、72、96 h采用CCK-8法检测2组细胞增殖吸光度(optical density,OD)值.结果 (1)SW1990 细胞 UCH37 mRNA(3.338±0.137)及蛋白(0.956±0.043)相对表达量均高于 HPDE 细胞(0.968± 0.040、0.056±0.003)(t=26.710,P＜0.001;t=36.080,P＜0.001).(2)转染 48 h,UCH37 敲低组 UCH37 mRNA(0.337±0.017)及蛋白(0.424±0.010)相对表达量均低于 UCH37 空白组(1.017±0.052、1.163±0.132)(t=21.810,P＜0.001;t=9.160,P＜0.001),细胞集落形成数[(27.0±7.9)个]少于 UCH37 空白组[(125.3±14.1)个](t=10.860,P＜0.001).UCH37 敲低组转染 48、72、96 h 时 OD 值(0.433±0.016、0.563±0.004、0.897±0.046)均低于 UCH37 空白组(0.531±0.014、0.826±0.017、1.859±0.126)(t=7.420,P=0.002;t=24.750,P＜0.001;t=12.300,P＜0.001),转染24 h时OD值与UCH37空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)转染48 h,UCH37敲低组CDC25A蛋白相对表达量(0.501±0.026)低于 UCH37 空白组(1.174±0.038)(t=23.090,P＜0.001),CDC25A mRNA 相对表达量与UCH37空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论去泛素化酶UCH37可通过CDC25A调控胰腺癌细胞周期增殖,敲低UCH37表达可抑制胰腺癌细胞的增殖.