摘要目的 观察神经病理性疼痛(NPP)大鼠应用miR-135a-5p mimic处理背根神经节(DRG)后FTO表达变化,探讨miR-135a-5p与FTO的靶向关系.方法 60只雄性SD大鼠,体质量200～240 g,随机分为假手术组(不结扎L5神经根+L5 DRG泵注生理盐水10 μL)、模型组[行脊神经结扎术(SNL),Ls DRG泵注生理盐水10 μL]、低剂量组(SNL+L5 DRG 泵注 10 μmol/L的miR-135a-5p mimic 10 μL)、高剂量组(SNL+L5 DRG 泵注 20 μmol/L的miR-135a-5p mimic 10 μL)各15只.4组分别于0 d及术后1、7、14、21 d各取5只大鼠测量机械刺激撤足阈值(PWT)和热刺激撤足潜伏期(PWL);分别于术后14 d各处死10只大鼠取DRG,采用实时荧光定量PCR法检测miR-135a-5p、FTO mRNA相对表达量,采用Western blot法检测FTO蛋白相对表达量.取大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-135a-5p与FTO的靶向关系.结果 (1)假手术组术后1、7、14、21 d时PWT[(23.76±1.79)、(23.52±1.49)、(23.10±1.74)、(23.18±1.57)g]、PWL[(11.84±0.40)、(11.78±0.47)、(12.04±0.58)、(12.04±0.58)s]与模型组[PWT:(8.56±1.90)、(8.44±1.45)、(7.78±0.80)、(7.20±0.99)g;PWL:(7.76±0.64)、(5.78±0.43)、(6.02±0.24)、(4.26±0.83)s]、低剂量组[PWT:(13.16±0.52)、(11.42±0.68)、(10.10±0.69)、(9.42±0.66)g;PWL:(8.90±0.75)、(8.20±0.57)、(7.18±0.61)、(5.36±0.50)s]、高剂量组[PWT:(17.02±1.05)、(14.58±0.62)、(12.34±0.40)、(11.58±0.67)g;PWL:(9.84±0.87)、(9.02±0.94)、(8.46±0.32)、(6.12±1.33)s]比较差异均有统计学意义(F=101.100、164.500、212.200、235.600,P 均＜0.001;F=31.500、75.530、69.850、79.980,P 均＜0.05).术后各时间点模型组、低剂量组、高剂量组、假手术组PWT、PWL依次增高(P＜0.05).(2)假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组术后 14 d 时 miR-135a-5p 相对表达量(1.03±0.13、0.50±0.09、3.82±0.30、5.17±1.34)、FTO mRNA 相对表达量(1.01±0.10、4.13±1.20、3.64±0.96、2.68±0.78)、FTO 蛋白相对表达量(100.00±6.77、228.80±78.26、198.10±28.38、178.50±38.47)比较差异均有统计学意义(F=52.150、12.710、7.140,P 均＜0.05).模型组、低剂量组、高剂量组术后14 d时miR-135a-5p相对表达量均低于假手术组(P＜0.05),FTO mRNA及蛋白相对表达量均高于假手术组(P＜0.05);低、高剂量组miR-135a-5p相对表达量均高于模型组(P＜0.05),FTO mRNA及蛋白相对表达量均低于模型组(P＜0.05);高剂量组miR-135a-5p、FTO mRNA及蛋白相对表达量与低剂量组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)miR-135a-5p mimic+FTO-WT 组荧光素酶活性(0.39±0.21)低于 miR-135a-5p scramble+FTO-WT组(1.00±0.24)(t=0.230,P=0.002),miR-135a-5p mimic+FTO-Mut 组荧光素酶活性(0.96±0.12)与 miR-135a-5p scramble+FTO-Mut 组(1.02±0.17)比较差异无统计学意义(t=0.650,P=0.530).miR-135a-5p 靶向 FTO.结论 miR-135a-5p通过抑制大鼠DRG中FTO的表达缓解NPP.