摘要目的 采用单细胞转录组测序技术分析巨细胞病毒(CMV)感染的胶质母细胞瘤(GBM)组织转录组图谱,探讨CMV感染与GBM免疫微环境的关系.方法 2022年12月—2023年8月新疆医科大学第二附属医院诊治GBM患者20例,收集GBM组织,采用胶体金免疫电镜和微滴式数字PCR技术鉴定GBM组织中是否存在CMV颗粒及遗传物质,比较CMV阳性与阴性GBM组织病毒拷贝数.采用单细胞转录组测序技术分析6例CMV阳性和3例CMV阴性GBM组织的转录组图谱,鉴定共表达巨噬细胞标志物和肿瘤细胞标志物的免疫细胞亚群,对该免疫细胞亚群采用免疫荧光染色和流式细胞术验证,并分析差异表达基因及涉及的信号通路.结果 胶体金免疫电镜结果显示,CMV阳性GBM组织存在稀少的金标记电子致密颗粒,与CMV颗粒形态一致.微滴式数字PCR结果显示,12例CMV阳性,8例CMV 阴性;CMV 阳性 GBM 组织病毒拷贝数[(150±30)copies/mL]高于 CMV 阴性 GBM 组织[(10±5)copies/mL](t=7.200,P＜0.001).单细胞转录组测序鉴定出CMV阳性和阴性GBM组织中均存在肿瘤细胞、巨噬细胞、少突胶质细胞、内皮细胞、基质细胞、T淋巴细胞6种主要细胞类型,以及1种新的免疫细胞亚群即共表达巨噬细胞标志物CD68和肿瘤细胞标志物SOX2的双阳性肿瘤相关巨噬细胞(TAM)(CD68+SOX2+TAM).免疫荧光染色结果显示,CMV阳性GBM组织中CD68和SOX2共表达,CMV阴性GBM组织中CD68和SOX2共表达不明显.流式细胞术分析结果显示,CD68+SOX2+TAM在CMV阳性GBM组织中富集;CMV阳性GBM组织CD68+SOX2+TAM百分比[(4.86±0.25)％]高于CMV阴性GBM组织[(0.94±0.41)％](t=8.160,P＜0.001).功能分析结果显示,CMV阳性和阴性GBM组织CD68+SOX2+TAM的差异表达基因主要与CMV感染有关,涉及病毒蛋白与细胞因子及其受体相互作用的信号通路.结论 GBM患者可能存在CMV感染,CMV感染可诱导共表达巨噬细胞和肿瘤细胞标志物的双阳性TAM(CD68+SOX2+TAM)产生从而重塑GBM免疫微环境.