摘要目的 观察结肠腺癌组织和HT29细胞P16INK4A表达变化,探讨上调P16INK4A表达对HT29细胞Wnt/β-catenin信号通路及生物学行为的影响.方法 2023年1-12月河南大学第一附属医院诊治结肠腺癌患者23例,收集手术切除的结肠腺癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测P16INK4AmRNA相对表达量.取对数生长期HT29细胞,分为对照组(正常培养)、pcDNA3.0组(转染pcDNA3.0质粒)、pcDNA3.0-P16INK4A组(转染pcDNA3.0-P16INK4A质粒),转染后培养48 h取3组细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度(OD)值,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率,采用Transwell小室实验检测侵袭细胞数,采用实时荧光定量PCR法检测P16INK4A、β-catenin、c-Myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、T细胞因子-4(TCF-4)mRNA相对表达量,采用Western blot法检测P16INK4A、β-catenin、c-Myc、cyclin D1、TCF-4蛋白相对表达量.结果 结肠腺癌组织P16INK4A mRNA相对表达量(0.53±0.08)低于癌旁组织(1.00±0.10)(t=17.604,P＜0.001).转染后培养48 h,3组细胞增殖OD值、细胞凋亡率、细胞迁移率、侵袭细胞数比较差异均有统计学意义(F=39.000、241.449、44.816、24.052,P均＜0.05);pcDNA3.0-P16INK4A组细胞增殖 OD值(0.47±0.05)、细胞迁移率[(21.38±2.85)％]均低于 pcDNA3.0 组[0.85±0.10、(40.79±4.53)％]、对照组[0.82±0.09、(41.85±4.97)％](P＜0.05),细胞凋亡率[(35.28±3.74)％]均高于 pcDNA3.0 组[(10.09±1.13)％]、对照组[(9.26±1.02)％](P＜0.05),侵袭细胞数[(102.33±12.27)个]均少于 pcDNA3.0 组[(158.33±16.45)个]、对照组[(155.33±17.93)个](P＜0.05).3 组细胞 P16INK4A、β-catenin、c-Myc、cyclin D1、TCF-4 mRNA 及蛋白相对表达量比较差异均有统计学意义(F=31.484～83.046,P均＜0.05);pcDNA3.0-P16INK4A组P16INK4A mRNA及蛋白相对表达量均高于pcDNA3.0组、对照组(P＜0.05),β-catenin、c-Myc、cyclin D1、TCF-4 mRNA及蛋白相对表达量均低于pcDNA3.0组、对照组(P＜0.05);以上指标pcDNA3.0组与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人结肠腺癌组织P16INK4A呈低表达;上调P16INK4A表达可通过影响HT29细胞Wnt/β-catenin信号通路活性抑制HT29细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡.