增强细胞缝隙连接功能对三阴性乳腺癌细胞放疗敏感性的研究

Enhanced cell gap junctions promotes the radiosensitivity in triple negative breast cancer cells

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摘要目的：研究增强细胞缝隙连接功能对三阴性乳腺癌细胞放疗敏感性的影响。方法运用脂质体2000将pcDNA／5－Cx43表达载体转染HCC70（三阴性）、MCF－7（ ER阳性）和SK－BR3细胞（ HER－2阳性）；细胞经不同剂量电离辐射（0、5、10、15 Gy）照射后运用Western blot测定细胞中Cx43蛋白水平；荧光示踪法测定细胞连接功能，运用MTT法、克隆形成实验、AnnexinV－FITC／PI双染法和流式细胞仪分别测定细胞的增殖、克隆形成能力以及细胞凋亡情况。结果转染的HCC70－Cx43、MCF－7－Cx43和SK－BR3－Cx43细胞中Cx43蛋白水平显著增加，经不同剂量辐照后Cx43蛋白表达量逐渐增加，具有剂量依赖效应；荧光示踪结果显示随着电离辐射剂量的增加，荧光密度逐渐升高；HCC70－Cx43、MCF－7－Cx43和SK－BR3－Cx43细胞活性和克隆形成能力逐渐降低，具有剂量－时间依赖效应；相同情况下，HCC70－Cx43细胞的增殖能力和克隆形成能力的抑制作用高于MCF－7－Cx43和SK－BR3－Cx43细胞；AnnexinV－FITC／PI和流式细胞仪结果显示，随着辐照剂量的增加，细胞凋亡率逐渐升高。结论增强细胞缝隙连接功能可提高乳腺癌细胞，尤其是三阴性乳腺癌细胞的放疗敏感性；辐射能增强乳腺癌细胞的缝隙连接功能，二者协同作用增强三阴性乳腺癌的细胞毒性。