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抗CEA抗体可变区基因的克隆及其嵌合抗体的表达

Cloning of variable regions genes of a anti-CEA monoclonal antibody and expression of the human-mouse chimeric antidody

摘要目的在真核细胞中表达抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)人-鼠嵌合抗体.方法从分泌抗CEA鼠单抗C50的杂交瘤细胞中扩增、克隆可变区基因.测序鉴定后连入真核表达载体,导入二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr)细胞进行表达.采用间接和竞争抑制ELISA检测表达产物的人源性和抗原结合特异性.结果序列测定初步确定所克隆的是功能性抗体可变区基因.在转染细胞上清中测到抗CEA嵌合抗体的表达.ELISA试验证实该嵌合抗体具有人的恒定区,并与原鼠单抗C50有相同的抗原结合特异性.结论成功地在真核细胞中表达了抗CEA人-鼠嵌合抗体.

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