换一批何首乌ISSR-PCR反应体系的建立与优化
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Polygonum multiflorum Thunb.
摘要目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.
更多相关知识
分类号
R282.5（中药学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-0805.2008.03.026
发布时间
2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省社会发展专项基金（63108）
- 浏览0
- 被引21
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
