换一批
换一批RNAi研究TrxR1在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节
RNA Interference Studying the Role of TrxR1 Gene in Proliferation of Hepatocarcinoma Cells and Adjustment of Several TCM Therapeutical Principles
摘要目的 观察不同中医治法对大鼠肝癌TrxR1表达的调控差异,以及TrxR1在人肝癌细胞增殖中的作用.方法 将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组以及实验组,除正常组外均采用DEN诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)TrxR1表达的差异；设计2个人TrxR1基因siRNA靶点,将重组质粒通过脂质体转染入SMMC - 7721人肝癌细胞株,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况、Real-time - PCR检测该基因的表达差异.结果 芯片结果显示,TrxR1基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,益气健脾治法明显下调其表达；采用MTT法筛选到一个TrxR1基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制；实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达量明显降低.结论 肝癌细胞恶性增殖有赖于TrxR1基因的高表达,益气健脾方药能显著下调该基因表达.
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