摘要目的 探讨miR-149-5p与Hh信号通路对肝星状细胞活化及纤维化的作用和慈菇消脂方对肝纤维化的干预机制.方法 实验细胞分为7组:正常对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1+2%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+4%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+6%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+miR-149-5p inhibitor转染+6%含药血清组、TGF-β1+miR inhibitor NC转染+6%含药血清组.对慈菇消脂方含药血清进行非靶标代谢组学检测,CCK-8检测各组细胞活力.Q-PCR检测各组细胞miR-149-5p表达,Q-PCR和Western-Blot检测各组细胞中α-SMA、Col-Ⅰ、Shh、Gli1、Gli2基因和蛋白表达.结果 慈菇消脂方含药血清中含有慈菇消脂方治疗肝纤维化的核心成分.与正常对照组比较,TGF-β1诱导组细胞活力及Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ、α-SMA表达升高(P<0.05).与TGF-β1诱导组相比,6%慈菇消脂方含药血清组细胞活力及Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ、α-SMA表达降低(P<0.05),miR-149-5p表达上调(P<0.01).与6%慈菇消脂方含药血清组相比,TGF-β1+miR-149-5p inhibitor转染+6%含药血清组细胞活力升高(P<0.01),miR-149-5p表达降低(P<0.01),α-SMA、Col-Ⅰ、Gli2表达升高(P<0.05).结论 慈菇消脂方含药血清可通过调控miR-149-5p下调α-SMA、Col-Ⅰ、Gli2表达,从而抑制肝星状细胞活化,发挥抗肝纤维化作用.
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