冠心康调控FTO的m6A甲基化抑制炎症和凋亡抗动脉粥样硬化的研究

Guanxinkang inhibits inflammation and apoptosis and prevents atherosclerosis by regula-ting m6A methylation of FTO

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摘要目的观察冠心康对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中去甲基化酶FTO甲基化水平、炎症和凋亡的影响.方法将体外培养的HUVEC细胞随机分为空白对照(NC)组、脂多糖(LPS)组和冠心康(GXK)组.采用CCK8法检测不同浓度LPS和冠心康对HUVEC细胞增殖活性的影响,筛选出造模和冠心康干预的最佳浓度;造模及冠心康治疗24h后,利用m6A RNA定量试剂盒(比色法)检测m6A RNA甲基化水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)法检测FTO mRNA及蛋白的表达量,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子变化,流式细胞术检测各种细胞凋亡水平.结果 (1)分别选择1μg/mL和6μg/mL作为脂多糖和冠心康的最佳浓度;(2)与NC组比较,LPS组m6A RNA甲基化水平升高(P＜0.05),与LPS组比较,冠心康组m6A RNA甲基化水平降低(P＜0.05);(3)与NC组比较,LPS组FTO mRNA及蛋白表达量降低(P＜0.05),与LPS组比较,冠心康干预后FTO mRNA及蛋白表达量升高(P＜0.05);(4)与NC组比较,LPS组细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子水平升高(P＜0.05),与LPS组比较,冠心康组IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子水平下降(P＜0.05);(5)与NC组比较,LPS组细胞凋亡率增加(P＜0.05),与LPS组比较,冠心康组细胞凋亡率下降(P＜0.05).结论冠心康可能通过调控去甲基化酶FTO抑制LPS诱导的炎症和凋亡抗动脉粥样硬化.