黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及对小鼠血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β表达的影响
Neuroprotective effects of Huangqi Chifeng Decoction on cerebral ischemia/reperfusion injury and its impact on the expressions of CRP,TNF-α,IL-18 and IL-1β in mouse serum
摘要目的 探索黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及对小鼠血清中炎症因子CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β表达的影响.方法 体外:将BV2 细胞分为对照组、模型组及黄芪赤风汤低、中、高剂量组 5 组,构建氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)模型,采用CCK-8 法检测细胞的活性;体内:使用随机数字表的方法,将 25 只C57BL/6 小鼠随机分配到以下 5组:假手术组、模型组及低、中、高剂量的黄芪赤风汤组,构建大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)对小鼠进行神经行为学评价,TTC染色估算小鼠脑组织梗死体积,HE和Nissl染色观察小鼠脑组织内神经元的变化,ELISA检测血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β的表达.结果 体外:模型组BV2 细胞存活率较对照组降低(P=0.000 4<0.001);黄芪赤风汤低、中、高剂量组BV2 细胞存活率均较模型组提高,以高剂量组最为明显,但差异无显著性(P=0.345 9>0.05).体内:模型组小鼠的mNSS评分较假手术组显著升高(P<0.000 1),脑组织梗死体积明显增加(P=0.000 2<0.001),脑组织梗死部位的神经元发生形态改变,部分神经元变性、坏死,伴有空泡形成,细胞核固缩、深染,胞质内尼氏体的数量减少且着色变浅,血清中的炎症因子CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β的表达均明显增加(P<0.000 1);黄芪赤风汤低、中、高剂量组的mNSS评分均较模型组有不同程度的降低,以黄芪赤风汤高剂量组最为明显(P=0.000 2<0.001),且脑组织的梗死体积减少,尤其是高剂量组(P=0.014 4<0.05),脑组织梗死部位的神经元病理形态得到改善,血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β 表达水平降低,亦以高剂量组效果最佳(P=0.000 1<0.001,P=0.001 1<0.01,P<0.000 1,P=0.000 3<0.001).结论 黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤具有一定的神经保护作用,其作用机制可能与CRP、IL-18、IL-1β等炎症因子介导的神经炎症反应密切相关.
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