小续命汤对氧糖剥夺/复氧后星形胶质细胞活化的影响
Effect of Minor Xuming Decoction(小续命汤)on astrocyte activation after oxygen-glucose deprivation/reoxygenation
摘要目的 探讨小续命汤对氧糖剥夺/复氧后星形胶质细胞活化作用机制的影响.方法 建立氧糖剥夺2.5h,复氧24h模型进行体外实验,模拟脑缺血再灌注损伤.将人星形胶质细胞U251随机分为对照组、氧糖剥夺/复氧组、星形胶质细胞活化抑制剂-氟代柠檬酸组(0.25mmol·L-1)、小续命汤组(50mg·L-1),倒差显微镜观察各组细胞形态变化,二硝基苯肼法检测LDH活性,透射电镜观察细胞超微结构改变,免疫荧光染色检测星形胶质细胞活化标志蛋白GFAP和S100β的荧光强度,Western blot检测各组细胞中GFAP和S100β蛋白表达水平.结果 与对照组相比,模型组细胞胞体开始肢解,线粒体呈现肿胀甚至空泡样改变,细胞活力明显下降,LDH活性显著增加(P<0.05),GFAP和S100β的荧光强度及蛋白表达水平显著增加(P<0.05).与氧糖剥夺/复氧组相比,氟代柠檬酸组及小续命汤组可改善细胞形态及超微结构,提升生存率(P<0.05),降低细胞漏出率(P<0.05),GFAP和S100β荧光强度和蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 小续命汤可能通过抑制星形胶质细胞的活化来减轻由氧糖剥夺/复氧诱导的损伤,这可能与降低星形胶质细胞活化标志物GFAP和S100β蛋白的表达水平有关.
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