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丹葛解酲汤调控P53/SLC7A11/GPX4信号通路对乙醇诱导的大鼠BRL-3A肝细胞铁死亡的影响

Effect of Dange Jiecheng Decoction(丹葛解酲汤)on ethanol-induced ferroptosis in rat BRL-3A hepatocytes via the P53/SLC7A11/GPX4 signaling pathway

摘要目的 探讨丹葛解酲汤对乙醇诱导的BRL-3A细胞铁死亡影响及潜在作用机制.方法 选用40只雄性SD大鼠制备含药血清.以不同浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%)乙醇对BRL-3A细胞进行处理,通过CCK-8法选出细胞IC50的浓度以及时间.不同浓度丹葛解酲汤含药血清(1.25%、2.5%、5%、10%)进行干预,CCK-8法选出细胞活力最佳的给药浓度.随后将细胞重新分组为空白组、模型组、丹葛解酲汤组、Fer-1组.比色卡法与分光法检测Fe2+、GSH、MDA的含量;荧光探针检测ROS;免疫荧光法检测P53、FTH1、SLC7A11平均荧光强度;蛋白免疫印迹法和PCR法分别检测细胞中P53、SLC7A11、GPX4、NOX1、PTGS2、FTH1蛋白和mRNA的表达水平.统计分析采用单因素方差分析.结果 与空白组相比,模型组的ROS、MDA含量和Fe2+的水平升高(P<0.01);GSH水平下降(P<0.01);FTH1、SLC7A11平均荧光强度减弱(P<0.01),P53平均荧光强度增强(P<0.01);P53、NOX1、PTGS2 mRNA以及蛋白表达量增加(P<0.01),SLC7A11、FTH1、GPX4 mRNA以及蛋白表达量减少(P<0.01).与模型组相比,丹葛解酲汤含药血清组和Fer-1组的MDA、ROS含量和Fe2+的水平降低(P<0.05,P<0.01);GSH水平升高(P<0.05,P<0.01);P53的平均荧光强度减弱(P<0.01),FTH1和SLC7A11平均荧光强度增强(P<0.01);P53、NOX1、PTGS2mRNA以及蛋白水平的表达减少,SLC7A11、GPX4、FTH1mRNA以及蛋白水平的表达增加(P<0.05,P<0.01).结论 丹葛解酲汤通过下调P53的表达,促进其下游SLC7A11蛋白的表达,促进GSH合成,GPX4表达增加,减少脂质过氧化反应,抑制铁死亡达到保护肝细胞的功效.

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2026年37卷2期

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