小鼠PD-L1真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的稳定表达
Construction of eukaryotic expressing vector of mouse PD-L1 and establishment of stable transfectant CHO cell line
摘要目的 构建含有小鼠PD-L1基因的真核表达载体,并通过转染获得稳定表达小鼠PD-L1分子的CHO细胞系.方法 从小鼠脾细胞总RNA逆转录的cDNA中扩增出PD-L1基因,通过双酶切(Xho Ⅰ和EcoRⅠ)装入真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选后,建立稳定高表达PD-L1分子的CHO细胞系.结果 构建了真核表达载体plRES2-EGFP/PD-L1,建立了稳定表达PD-L1目的基因的CHO细胞系.结论 成功构建了 PD-L1真核表达载体并获得了稳定表达该分子的CHO细胞系为后续研究奠定了物质基础.
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