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基于小鼠谱系追踪的围着床期子宫内膜上皮-间质转化探究

Study of endometrial epithelial-mesenchymal transition of peri-implantation period based on mouse lineage tracing

摘要目的 利用LtfcreRosa26mT/mG小鼠模型,进行围着床期子宫内膜上皮-间质转化(EMT)的谱系追踪研究,寻找子宫内膜EMT的直接形态学证据.方法 收集8周龄雌性LtfcreRosa26mT/mG小鼠子宫组织进行冰冻切片,分别与上皮细胞、间质细胞、免疫细胞的标志物E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,激光共聚焦荧光显微镜(confocal)观察成像.围着床期研究:8周龄的Ltfcre Rosa26mT/mG雌鼠与可育雄鼠按1∶1合笼,以见栓当日上午为0.5 dpc,收集2.5 dpc、3.5 dpc、4.0 dpc、4.5 dpc的小鼠子宫进行冰冻切片,分析胚胎种植对子宫内膜EMT的影响.雌孕激素序贯刺激模型:8周龄的雌性LtfcreRosa26mT/mG小鼠进行卵巢切除术,2周后进行雌激素(E2)、孕激素(P4)序贯刺激,在不同处理后收集小鼠子宫组织,分析雌孕激素对子宫内膜EMT的影响.结果 LtfcreRosa26mT/mG小鼠子宫内膜间质中零星分布着增强绿色荧光蛋白阳性(EGFP+)细胞,与E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,confocal结果显示,部分EGFP+细胞表现为Vimentin+,这部分Vimentin+EGFP+细胞即为由上皮细胞EMT形成的间质细胞.围着床期研究:围着床期中,与2.5 dpc、4.0 dpc相比,3.5 dpc时子宫内膜间质中EGFP+细胞个数显著降低(P<0.01).雌孕激素序贯刺激模型:与卵巢切除后相比,E2刺激后间质中EGFP+细胞数量显著降低,休息2 d后间质中EGFP+细胞数量显著增加,P4刺激后间质中EGFP+细胞数量又显著降低(P<0.05).结论 子宫内膜中存在上皮细胞EMT形成的间质细胞,子宫内膜EMT在非胚胎植入时期就已经存在,且受到雌孕激素的严格调控.

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