摘要目的 分析生物钟基因脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白类似蛋白1(BMAL1)对Ras同源物基因组成员A(RhoA)/Rho相关激酶1(ROCK1)信号通路的影响以及对滋养层细胞生物学功能的调控机制.方法 选择滋养层细胞系JEG3细胞,根据转染BMAL1过表达质粒以及添加1 μmol/L、2 μmol/L、5 μmol/L ROCK1抑制剂Y27632,分为对照组、BMAL1 组、BMAL1+1 μmol/L Y27632 组、BMAL1+2 μmol/L Y27632 组、BMAL1+5 μmol/L Y27632 组.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测 BMAL1、RhoA、ROCK1以及上皮-间充质转化(EMT)标记物N-cadherin、Vimentin 和转录因子 Snail、Slug的mRNA表达水平;Western blot检测蛋白表达水平;CCK8法检测细胞的增殖活力;流式细胞术分别检测细胞周期、凋亡以及胞内活性氧(ROS)水平.结果 JEG3细胞过表达BMAL1后,与对照组相比,ROCK1 mRNA表达显著增加(P＜0.01),RhoA mRNA表达增加但差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,BMAL1组N-cadherin、Vimentin、Snail的mRNA表达水平显著增加(P＜0.01).在蛋白水平,BMAL1组ROCK1、RhoA及Snail蛋白表达较对照组显著增加(P＜0.05),Y27632处理可以显著降低Vimentin及Snail蛋白表达(P＜0.05).此外,与对照组相比,BMAL1组细胞活力显著增加(P＜0.001),BMAL1+Y27632各浓度组较BMAL1组细胞活力显著降低(P＜0.01).流式细胞术结果显示,与对照组相比,BMAL1组细胞周期由G0/G1期向S+G2/M期转化,细胞总凋亡率有降低趋势但差异无统计学意义(P＞0.05),胞内ROS 水平显著降低(P＜0.01);与 BMAL1 组相比,BMAL1+1 μmol/L Y27632 组和 BMAL1+2 μmol/L Y27632 组细胞早期凋亡率及总凋亡率显著增加(P＜0.05),BMAL1+1 μmol/L Y27632组细胞ROS平均荧光强度增加但差异无统计学意义(P＞0.05),BMAL1+2 μmol/L Y27632组细胞ROS平均荧光强度较BMAL1组显著增加(P＜0.001).结论 生物钟基因BMAL1通过促进ROCK1表达参与调控滋养层细胞增殖、DNA合成、凋亡及氧化应激水平.