摘要目的 探究推拿按法是否通过调节转化生长因子(TGF)-β1/Smad3信号通路来减轻激痛点的纤维化症状,从而去活化激痛点.方法 本研究分为两阶段,第一阶段将 27只无特定病原体(SPF)级的雌性SD大鼠随机分为对照 1 组、模型 1组和推拿 1 组,其中模型 1 组和推拿 1组进行为期 8周的钝性击打和离心运动.造模成功后,对推拿 1 组大鼠左下肢内侧的结节或者条索状紧绷带进行按法干预.通过机械痛阈(PPT)和软组织张力(STT)评估大鼠疼痛敏感性和组织硬度.采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察大鼠肌肉组织结构和纤维化情况,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠肌肉组织中炎症因子水平,采用免疫荧光和蛋白印迹法(WB)检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达.第二阶段将 45只SPF级雌性SD大鼠随机分为对照 2 组、模型 2 组、推拿 2 组、TGF-β1抑制剂(TI)组和推拿+TGF-β1激动剂(TA)组,除对照 2组外,其余各组均进行造模处理.造模成功后,推拿 2组进行按法干预,TI组腹腔注射TGF-β1 抑制剂苦参碱,推拿+TA组先腹腔注射TGF-β1激动剂SRI-011381盐酸盐后进行按法干预.通过WB检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1 和磷酸化-Smad3(p-Smad3)/Smad3的表达水平.结果 第一阶段研究结果发现,推拿可显著提高大鼠激痛点的PPT与STT(P<0.01),逆转大鼠激痛点肌肉纤维排列紊乱、肌细胞形态异常及纤维化加重等病理损伤.此外,模型 1 组大鼠激痛点组织中,白细胞介素(IL)-1β、IL-6、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎症因子和纤维化标志物(α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原)的表达升高,经推拿干预后均显著下调(P<0.05或P<0.01),说明推拿的治疗作用与激痛点局部炎症及纤维化水平的改善直接相关.第二阶段结果发现,TI组和推拿 2 组大鼠激痛点组织相较于模型 2 组,TGF-β1和p-Smad3/Smad3 的表达水平降低,IL-1β、IL-6、NF-κB、TNF-α等炎症因子和纤维化标志物(α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原)表达水平也下降(P<0.05或P<0.01).当联合使用TGF-β1通路激动剂时,推拿的治疗效应被显著削弱,激痛点局部TGF-β1及p-Smad3/Smad3 表达水平回升,纤维化与炎症反应再次加剧(P<0.05 或P<0.01).结论 推拿可有效减轻大鼠激痛点组织中的炎症反应和纤维化,其机制与抑制TGF-β1/Smad3 信号通路密切相关,该通路在推拿调控激痛点纤维化过程中发挥关键作用.