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5-杂氮-2′-脱氧胞苷上调CK13表达并抑制人肺鳞癌YTMLC-9细胞增殖

5-Aza-2′-deoxycytidine inhibits human lung squamous carcinoma YTMLC-9 cell by epigenetically silenced CK13 gene in vitro

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摘要目的：探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-杂氮2′-脱氧胞苷（5-aza-2′-deoxycytidine）对人肺鳞癌YTMLC-9细胞株增殖的影响及对细胞角蛋白13（CK13）表达和CK13基因甲基化的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度（1、2、5、10，20、40μmol/L）5-aza-2′-deoxycytidine处理1～4 d后的5-aza-2′-deoxycytidine对人肺鳞癌YTMLC-9细胞株生长的影响；采用半定量PCR及Western blot检测5μmol/L的5-aza-2′-deoxycytidine作用YTMLC-91～4 d CK13的表达；采用甲基化PCR检测不同浓度（1、2、5、10μmol/L）5-aza-2′-deoxycytidine 处理48 h后CK13甲基化和非甲基化的变化。结果：5-aza-2′-deoxycytidine对人肺鳞癌YTMLC-9细胞株的生长具有明显地抑制作用，当用药浓度高于20μmol/L后产生明显的细胞毒性；5-aza-2′-deoxycytidine能够上调CK13基因表达，呈时间依赖性。结论：5-aza-2′-deoxycytidine抑制人肺鳞癌YTMLC-9细胞的生长，抑制作用呈浓度、时间依赖性。5-aza-2′-deoxycytidine可以使CK13重新表达。其生物学效应可能与CK13启动子甲基化状态改变有关。