摘要目的:探究可变电荷Y(VCY)的液-液相分离特性及其对畸胎瘤细胞系NCCIT细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探索其发挥作用的分子机制.方法:应用原核表达系统表达VCY蛋白,蛋白纯化后在缓冲液中检测其相分离特性.在NCCIT细胞中外源性表达VCY(记作NCCIT VCY组),并设NCCIT Vector组和NCCIT组为对照组.通过免疫荧光技术检测细胞内VCY定位及相分离能力.应用基因本体(GO)功能分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析VCY对NCCIT细胞转录组的影响;通过CCK8实验和Transwell实验检测VCY对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.应用rMATS软件分析转录组测序数据,探索VCY对选择性剪接的调控;设计外显子特异性引物,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证VCY对STMN2 pre-mRNA选择性剪接的具体影响.结果:VCY的氨基酸序列中包含固有无序区域,在缓冲液和NCCIT细胞中均可发生液-液相分离;外源性VCY表达在转录组水平引起NCCIT细胞的38个基因表达上调(|log2FC|＞1,q＜0.05),50个基因表达下调(|log2FC|＞1,q＜0.05);GO和KEGG富集分析发现VCY主要参与调控细胞增殖、细胞黏附等信号通路(q＜0.01);与NCCIT组和NCCIT Vector组细胞相比,NCCIT VCY 组细胞增殖(F=92.79,P＜0.000 1)、迁移(F=42.57,P＜0.001)和侵袭(F=206.10,P＜0.000 1)能力显著提高.VCY参与STMN2基因的选择性剪接过程,使细胞中STMN2-001转录本水平提高,对STMN2-007和STMN2-008转录本无影响.结论:VCY作为一种癌-睾丸抗原,通过液-液相分离参与STMN2等基因的选择性剪接,促进NCCIT细胞的增殖、迁移和侵袭.