活性污泥中硝化细菌16S rDNA鉴定方法研究
Identification of Ammonia Oxidizer and Nitrite Oxidizer in Activated Sludge by 16S rDNA Sequencing
摘要目的以活性污泥为材料,研究其中硝化细菌的分离及16S rDNA 鉴定方法.方法采用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌富集、分离技术从武汉某啤酒厂曝气池活性污泥中分离得到2株纯培养菌株N1和N2.分别提取2株细菌的总DNA,利用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌的16S rDNA特异性引物进行多聚酶链反应(PCR)扩增;扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳和Sanger末端终止法测序分析,用NCBI-Blast软件将测序结果在Genbank等数据库中进行同源性检索.结果 N1和N2的DNA扩增产物片断大小分别为526 bp和391 bp,测序结果经检索证实N1、N2分别与标准菌株Nitrosomonas sp. DYS317和Nitrobacter sp. R6的保守性片段有99%、100%的同源性.结论可以判定所分离得到的N1和N2菌株分别为亚硝化单胞菌属和硝化杆菌属.
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